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[推荐]显微镜技术原理详解
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(7)微调螺旋 用粗调螺旋只能粗放地调节焦距,难于观察到清晰的物像,因而需要用微调螺旋做进一步调节。微调螺旋每转一圈镜筒仅移动0.1 mm(100μm)。新近出产的研究显微镜的粗调螺旋和微调螺旋是共轴的。

2.显微镜的光学系统显微镜的光学系统由反光镜,聚光器,物镜,目镜等组成,光学系统使标本物像放大,形成倒立的放大物像。

(1)反光镜 早期的普通光学显微镜常用自然光检视标本,在镜座上装有反光镜。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成,可以将投射在它上面的光线反射到聚光器透镜的中央,照明标本。不用聚光器时用凹面镜也能起汇聚光线的作用。用聚光器时,一般都用平面镜。新近出产的研究显微镜镜座上装有光源,并有电流调节螺旋,可通过调节电流大小来调节光照强度。

(2)聚光器 聚光器在载物台下面。一般由聚光透镜、虹彩光圈和升降螺旋组成。聚光器可分为明视场聚光器和暗视场聚光器。普通光学显微镜配置的都是明视场聚光器,明视场聚光器有阿贝聚光器、齐明聚光器和摇出聚光器。阿贝聚光器在物镜数值孔径高于0.6时会显示出色差和球差。齐明聚光器对色差、球差和慧差的校正程度较高,是明视场镜检中质量最好的聚光器,但它不适于4倍以下的物镜。摇出聚光器能将聚光器上透镜从光路中摇出满足低倍物镜(4×)大视场照明的需要。聚光器安装在载物台下,其作用是将光源经反光镜反射来的光线聚焦于样品上,以得到最强的照明,使物像获得明亮清晰的效果。聚光器在光学系统中的位置可以通过其上的两个调节螺杆将光圈调小后进行聚中调节。其高低也可以调节,使焦点落在被检物体上,以得到最大亮度。一般聚光器的焦点在其上方1.25mm处,而其上升限度为载物台平面下方0.1mm。因此,要求使用的载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,否则被检样品不在焦点上,影响镜检效果。聚光器前透镜组前面还装有虹彩光圈,它可以开大和缩小,影响成像的分辨力和反差,若将虹彩光圈开放过大,超过物镜的数值孔径时,便产生光斑;若收缩虹彩光圈过小,虽反差增大,但分辨力下降。因此,在观察时一般应将虹彩光圈调节开启到视场周缘的外切处,使不在视场内的物体得不到任何光线的照明,以避免散射光的干扰。

(3)物镜 安装在镜筒前端转换器上的物镜利用入射光线时被检物像进行第一次造像,物镜成像的质量对分辨力有着决定性的影响。物镜的性能取决于物镜的数值孔径(numerical apeature简写为NA),每个物镜的数值孔径都标在物镜的外壳上,数值孔径越大,物镜的性能越好。 物镜的种类很多,可从不同角度来分类: 根据物镜前透镜与被检物体之间的介质不同,可分为: 1)干燥系物镜 以空气为介质,如常用的40×以下的物镜,数值孔径均小于1。 2)油浸系物镜 常以香柏油为介质,此物镜又叫油镜头,其放大率为90×~100×,数值孔值大于1。 根据物镜放大率的高低,可分为: 1)低倍物镜 指1×~6×,NA值为0.04~0.15; 2)中倍物镜 指6×~25×,NA值为0.15~0.40; 3)高倍物镜 指25×~63×,NA值为0.35~0.95; 4)油浸物镜 指90×~100×,NA值为1.25~1.40。 根据物镜对像差和色差校正的程度来分类,可分为: 1)消色差物镜 是最常用的物镜,外壳上标有"Ach"字样,该物镜可消除红光和青光形成的色差。镜检时通常与惠更斯目镜(Huygens eyepiece)配合使用。 2)复消色差物镜 物镜外壳上标有“Apo”字样,除能校正红、蓝、绿三色光的色差外,还能校正黄色光造成的像差,通常与补偿目镜配合使用。 3)特种物镜 在上述物镜基础上,为达到某些特定观察效果而制造的物镜。如带校正环物镜、带视场光阑的物镜、相差物镜、荧光物镜、无应变物镜、无罩物镜、长工作距离物镜等。目前研究显微镜常用的物镜还有:半复消色差物镜(semi-APO)、平场物镜(Plan)、平场复消色差物镜(Plan Apo)、超平场物镜(Splan)、超平场复消色差物镜(Splan Apo)等。
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